細(xì)胞截留系統(tǒng)是一種生物學(xué)中常用的技術(shù)手段,可同時分離出單個或多個細(xì)胞子群,被廣泛應(yīng)用于所涉及領(lǐng)域的研究和創(chuàng)新中。具體而言,在血細(xì)胞中它可以采集白血細(xì)胞(WBC)、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等,診斷各種血液疾?。辉谀[瘤領(lǐng)域中,它可以從體液或腫瘤質(zhì)取樣提供分子水平分析的標(biāo)本。屬于分子分離技術(shù)中的濾膜分離技術(shù)。其基本原理是使用高分子多孔膜材料作為過濾介質(zhì),通過設(shè)定合適的操作參數(shù),篩選出不同尺寸,不同種類的細(xì)胞信號并通過更加高效的方式進(jìn)行分離直接開展進(jìn)一步分子分析。
細(xì)胞截留系統(tǒng)的運作原理:
1.將有機(jī)樣品(如人外周血)稀釋到合適濃度,并添加生理鹽水稀釋到控制的比例,保證細(xì)胞營養(yǎng)和適應(yīng)環(huán)境后進(jìn)行處理;
2.通常,細(xì)胞懸浮液首先在“沉降板”上富集一段時間。然后,血樣進(jìn)入濾膜組件,其中的多孔濾膜只允許低分子量的溶質(zhì)、電介質(zhì)等通過,而阻擋大分子細(xì)胞還有纖維蛋白原等成份,從而實現(xiàn)混雜物的除去。
3.經(jīng)過前兩個步驟,截留細(xì)胞就位于濾膜的截留面,與濾膜表面接觸并成薄層狀排布。這時可以利用設(shè)備*的結(jié)構(gòu)和操作方法,關(guān)閉濾膜與收集盤之間的通道,在將負(fù)責(zé)截留的THB-10柱中的rosette清單給沿著抓手式印花扭出器或人力管直推壓入,約四五分鐘即可從THB-10柱的下部容量查看單克隆斑,并驗證其單克隆性。
4.目標(biāo)是從樣品中純化出感興趣的單個細(xì)胞亞群,獲得高純度,不能解決單個細(xì)胞分離問題的時候,利用光學(xué)顯微這種物聯(lián)網(wǎng)設(shè)備以及高精度夾具結(jié)構(gòu)分類、定位和提取細(xì)胞。
細(xì)胞截留系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于分離和分析不同細(xì)胞類型的分子、蛋白質(zhì)或小分子化合物,或者尋找某些特定分子與疾病之間的關(guān)聯(lián)。對于藥物篩選和開發(fā)而言,細(xì)胞截留系統(tǒng)是至關(guān)重要的工具。通過布置不同孔徑大小的過濾器,可分離出分子量較小的化合物,甚至納米級別的微粒子。微粒分離和富集也是生產(chǎn)過程中的關(guān)鍵步驟,可用于篩選生產(chǎn)所需的菌株并控制其數(shù)量。